CellDrop™自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀具有大量集成應(yīng)用程序設(shè)置,為生物化學(xué)和生命科學(xué)設(shè)施中的高可靠性分析測(cè)試提供了創(chuàng)新的解決方案。這些儀器可自動(dòng)執(zhí)行細(xì)胞計(jì)數(shù)過程,并在幾秒鐘內(nèi)提供準(zhǔn)確的活力評(píng)估。借助雙熒光和明場(chǎng)光學(xué)元件,它們可以通過加速初始計(jì)數(shù)和消除手動(dòng)過程可能存在的誤差幅...
常見細(xì)胞污染細(xì)胞污染——培養(yǎng)物出現(xiàn)渾濁、混濁。培養(yǎng)液pH值升高,液黃。細(xì)胞異常的形態(tài),如胞質(zhì)內(nèi)細(xì)菌吞噬體。細(xì)胞的生長(zhǎng)速率減緩,對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期變得不規(guī)律。異常的細(xì)胞死亡或細(xì)胞溶解情況。真菌污染——培養(yǎng)液可能出現(xiàn)異味。培養(yǎng)皿內(nèi)有異常的顏色、紋理或斑點(diǎn)。細(xì)胞顯示出不正常的細(xì)胞形態(tài),如真菌吞噬體或真菌絲狀體。細(xì)胞的生長(zhǎng)速率可能受到抑制,細(xì)胞數(shù)量不斷減少。支原體污染——支原體污染通常不會(huì)導(dǎo)致明顯的細(xì)胞培養(yǎng)液變化。因此,支原體污染通常需要PCR或DNA雜交來檢測(cè)??赡艹霈F(xiàn)感染跡象,如出現(xiàn)包涵...
傳代方法概述1.消化傳代:棄去培養(yǎng)基,PBS潤(rùn)洗一次后加入適量胰酶晃勻(以蓋住細(xì)胞表面為宜),放入培養(yǎng)箱消化。細(xì)胞呈斑片狀時(shí)加入等體積新鮮全培養(yǎng)基終止消化。吹打細(xì)胞后轉(zhuǎn)移懸液至潔凈離心管,600g離心5分鐘。棄去上清,用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞至培養(yǎng)瓶,補(bǔ)足培養(yǎng)液體積,移入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。2.直接傳代:用吸管吸取細(xì)胞懸液的1/2~1/4至另一瓶中;加入適量的新鮮培養(yǎng)基,補(bǔ)足培養(yǎng)液體積,培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。3.離心傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi),600g離心5min,棄去上清。使用新鮮的培養(yǎng)...
細(xì)胞基本操作●細(xì)胞復(fù)蘇●細(xì)胞密度判斷及換液●為什么需要細(xì)胞傳代●細(xì)胞凍存注意事項(xiàng)●常見細(xì)胞污染及處理細(xì)胞復(fù)蘇準(zhǔn)備工作——操作臺(tái)消毒潔凈,預(yù)熱培養(yǎng)基,準(zhǔn)備培養(yǎng)瓶及離心管解凍細(xì)胞及離心——從液氮/-80冰箱取出細(xì)胞,迅速轉(zhuǎn)移到37°C水浴鍋中,浸沒深度應(yīng)超過凍存物,并持續(xù)搖晃直至無凍塊。酒精棉球擦拭凍存管后移入操作臺(tái)。向凍存管中加入1ml預(yù)熱培養(yǎng)基,輕輕吹打,轉(zhuǎn)移所有液體至離心管。常溫800g離心5分鐘接種及培養(yǎng)——棄去上清,使用預(yù)熱的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞至培養(yǎng)瓶,立即放入培養(yǎng)箱。
選擇適當(dāng)?shù)募?xì)胞培養(yǎng)基是細(xì)胞培養(yǎng)中非常重要的步驟,它會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng)速率、狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)結(jié)果。1.首先參考文獻(xiàn)和廠家建議:查閱ATCC(AmericanTypeCultureCollection)或相關(guān)文獻(xiàn),了解以前研究同一或相似細(xì)胞系的人所使用的培養(yǎng)基和條件。細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)物廠商提供的說明都是有用的參考資料。2.根據(jù)細(xì)胞類型和實(shí)驗(yàn)需求:常規(guī)來說,培養(yǎng)基均需要添加10-15%血清(一般為胎牛血清)以提供蛋白,部分生長(zhǎng)因子,維生素及其他輔助物質(zhì)。以促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)、維持表型。非無菌室的細(xì)...
常見培養(yǎng)基類型及適配細(xì)胞DMEM(Dulbecco'sModifiedEagleMedium)DMEM是由美國(guó)科學(xué)家Eagle于1959年改良的,多用于上皮細(xì)胞,神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞。成分:DMEM包括基礎(chǔ)培養(yǎng)基,如高糖量的DMEM和低糖量的DMEM。DMEM包含的主要成分包括高濃度的葡萄糖、氨基酸、維生素、鹽類、L-谷氨酰胺和胰酶抑制劑。適用范圍廣。MEM(MinimumEssentialMedium)MEM最早由Eagle于1959年開發(fā)??捎糜诔衫w維細(xì)胞和原代大...
elisa試劑盒是一種在生物實(shí)驗(yàn)中廣泛使用的工具,它能夠提高實(shí)驗(yàn)效率和準(zhǔn)確性,為科研人員提供了便利和可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。一、簡(jiǎn)介它通過將抗原或抗體結(jié)合到固相載體上,再用酶標(biāo)抗體或酶標(biāo)抗原進(jìn)行二次反應(yīng),然后通過檢測(cè)反應(yīng)產(chǎn)物的顏色來定量測(cè)定樣本中待測(cè)物的濃度。elisa試劑盒具有高靈敏度、高特異性和可定量等優(yōu)點(diǎn),因此在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。二、優(yōu)勢(shì)靈敏度高:可以檢測(cè)出低濃度的抗原或抗體,靈敏度比傳統(tǒng)的免疫學(xué)方法更高。特異性好:采用特異性抗體或抗原,因此能夠準(zhǔn)確檢測(cè)出目標(biāo)物質(zhì),避免...